国产三级精品三级在专区_琪琪av色原伊人大芭蕉_免费A级黄毛片_精品国产AV色欲果冻传媒

低于血(xue)清、腹水和(he)(he)組織培養(yang)上清的澄清，離心和(he)(he)過濾是基(ji)本的實驗室(shi)技術，這(zhe)些技術可以去除會阻(zu)塞曾吸(xi)住的脂類(lei)和(he)(he)小顆粒(li)物質。對于某些樣品，緩沖液置換和(he)(he)除鹽也是必要的步驟。硫酸銨沉淀作為更進一步的預處理步驟，經常用于濃(nong)縮腹水中的免疫球蛋白。

一、抗血清

多克(ke)隆抗(kang)(kang)體有(you)(you)時不(bu)經純化的(de)(de)(de)(de)，稱為血(xue)(xue)清和抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清。抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清是(shi)指已經除去了凝(ning)血(xue)(xue)蛋(dan)(dan)白和血(xue)(xue)紅細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)免(mian)疫(yi)宿主(zhu)的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)液。抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清包(bao)含所(suo)(suo)有(you)(you)種(zhong)類的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)體、免(mian)疫(yi)球蛋(dan)(dan)白以及其他血(xue)(xue)清蛋(dan)(dan)白。它所(suo)(suo)包(bao)含的(de)(de)(de)(de)不(bu)僅有(you)(you)識(shi)別靶(ba)抗(kang)(kang)原的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)體，還有(you)(you)識(shi)別非(fei)靶(ba)抗(kang)(kang)原的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)體，在免(mian)疫(yi)分(fen)析中有(you)(you)時會(hui)發生非(fei)特異性反應。由(you)于這個原因，粗制抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清通常要(yao)進行(xing)純化，以去除血(xue)(xue)清蛋(dan)(dan)白，增加能特異和靶(ba)抗(kang)(kang)原相結合的(de)(de)(de)(de)免(mian)疫(yi)球蛋(dan)(dan)白的(de)(de)(de)(de)比(bi)列(lie)。

二、組織培養上清

單克隆(long)抗體可以通過雜交瘤(liu)細胞培(pei)養(yang)（細胞分泌性抗體）并(bing)收(shou)獲雜交瘤(liu)組織上(shang)的培(pei)養(yang)上(shang)清來獲得。

三、腹水

單克(ke)隆抗(kang)體可(ke)以通過在小(xiao)鼠(shu)的(de)腹(fu)(fu)腔中生長雜(za)交(jiao)瘤細胞而產(chan)生。雜(za)交(jiao)瘤細胞注射入小(xiao)鼠(shu)后(hou)，就會在小(xiao)鼠(shu)腹(fu)(fu)腔繁殖并產(chan)生液(ye)體（腹(fu)(fu)水），這種(zhong)腹(fu)(fu)水就包含了高濃度的(de)可(ke)收獲抗(kang)體，比(bi)雜(za)交(jiao)瘤細胞培養有更高的(de)抗(kang)體量(liang)。

四、抗體純化

多克隆(long)抗血清(qing)或單克隆(long)腹水、組織培養上清(qing)通常(chang)通過以下三(san)種(zhong)(zhong)方法的一(yi)種(zhong)(zhong)來進(jin)行(xing)純化(hua)。

1、蛋白A/G純化

蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白A/G純(chun)(chun)化(hua)是應用金(jin)黃色葡萄(tao)球菌的蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白A或(huo)鏈球菌的蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白G對免疫(yi)球蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白Fc段(duan)的高親和性。蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白A/G純(chun)(chun)化(hua)從粗制抗血(xue)清(qing)中去除(chu)了血(xue)清(qing)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白，但(dan)沒有去除(chu)非(fei)特異的免疫(yi)球蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)組分。結果蛋(dan)(dan)(dan)(dan)(dan)白A/G純(chun)(chun)化(hua)的抗血(xue)清(qing)仍然具有一小部分不(bu)期待的交叉反應性。

2、親和純化

親(qin)和純(chun)化是通過相(xiang)(xiang)似性(xing)分(fen)離(li)某(mou)一特(te)(te)(te)定蛋(dan)白(bai)(bai)或具有相(xiang)(xiang)似特(te)(te)(te)征的(de)一組蛋(dan)白(bai)(bai)。這種分(fen)離(li)蛋(dan)白(bai)(bai)的(de)技術是基于在(zai)蛋(dan)白(bai)(bai)和耦合于層析介質(zhi)上的(de)特(te)(te)(te)定配基之間的(de)一種可逆的(de)相(xiang)(xiang)互(hu)作用(yong)。抗原親(qin)和純(chun)化是利用(yong)免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(bai)能(neng)夠特(te)(te)(te)異性(xing)地同(tong)刺激它產生(sheng)抗原進行結(jie)合的(de)特(te)(te)(te)點，消除了大量的(de)非(fei)特(te)(te)(te)異免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(bai)成分(fen)，把與目(mu)標(biao)抗原特(te)(te)(te)異結(jie)合的(de)免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(bai)富集(ji)。因此(ci)親(qin)和純(chun)化后獲得的(de)主要(yao)是含目(mu)標(biao)特(te)(te)(te)異性(xing)免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(bai)。

3、前吸收

多克隆抗體(ti)有時(shi)要(yao)經過(guo)前吸收(shou)，也就是說(shuo)它們要(yao)被不同物(wu)種來源的其它蛋白(bai)或血清吸收(shou)，以消除可能的交(jiao)叉(cha)反應(ying)(ying)的抗體(ti)。這樣純化后的抗體(ti)春都(dou)和特異(yi)性都(dou)很(hen)高，任(ren)何交(jiao)叉(cha)反應(ying)(ying)都(dou)被顯著減(jian)少。